W badaniach biologicznych zwykle stosuje się polipeptydy o długiej sekwencji. W przypadku peptydów z ponad 60 aminokwasami w sekwencji ekspresja genów i SDS-PAGE są ogólnie stosowane do ich uzyskania. Jednak ta metoda zajmuje dużo czasu, a końcowy efekt separacji produktu nie jest dobry.
Wyzwania i rozwiązania dla długiej syntezy peptydów
W syntezie długich peptydów zawsze mamy do czynienia z problemem, to znaczy, że przeszkoda steryczna reakcji kondensacji wzrasta wraz ze wzrostem sekwencji w syntezie, a czas reakcji należy skorygować, aby reakcja zakończyła się. Jednak im dłuższy czas reakcji, tym więcej skutków ubocznych jest wytwarzane i powstaje część docelowego peptydu. Takie reszty - niedobór łańcuchów peptydów są kluczowymi zanieczyszczeniami wytwarzanymi w długiej syntezy peptydów. Dlatego w syntezie długiego peptydu kluczowym problemem, który musimy przezwyciężyć, jest zbadanie wysokiej jakości warunków reakcji i metod reakcji, aby reakcja kondensacji aminokwasowej była bardziej kompleksowa i pełna. Ponadto skróć czas reakcji, ponieważ im dłuższy czas reakcji, im bardziej niekontrolowane reakcje uboczne, tym bardziej złożone produkty uboczne. Dlatego podsumowano następujące trzy punkty:
Można zastosować syntezę mikrofalową: W przypadku niektórych aminokwasów napotkanych w procesie syntezy, które nie są łatwe do zintegrowania, można zastosować syntezę mikrofalów. Ta metoda ma niezwykłe wyniki i znacznie skraca czas reakcji i zmniejsza tworzenie dwóch kluczowych produktów ubocznych.
Można zastosować metodę syntezy fragmentów: Gdy niektóre peptydy są trudne do syntezy za pomocą wspólnych metod syntezy i nie łatwe do oczyszczenia, możemy przyjąć całą kondensację kilku aminokwasów w określonym segmencie peptydu do łańcucha peptydowego jako całości. Ta metoda może również rozwiązać wiele problemów w syntezie.
Można zastosować syntezę acyloydrazydu: Synteza acylohydrazydu peptydów jest metodą syntezy w fazie stałej N-końcowej peptydu Cys i C-końcowego polipeptydu hydrazydu selektywna reakcja selektywna między tworzeniem wiązań amidowych w celu osiągnięcia metody wiązania peptydu. W oparciu o pozycję Cys w łańcuchu peptydowym metoda ta dzieli cały łańcuch peptydowy na wiele sekwencji i syntetyzuje je odpowiednio. Wreszcie docelowy peptyd otrzymuje się poprzez reakcję kondensacji w fazie ciekłej. Ta metoda nie tylko znacznie skraca czas syntezy długiego peptydu, ale także znacznie zwiększa czystość produktu końcowego.
Długie oczyszczanie peptydu
Specjalizacja długich peptydów nieuchronnie prowadzi do złożonych składników surowych peptydów. Dlatego jest również wyzwaniem o oczyszczaniu długich peptydów przez HPLC. Seria amyloidów procesu oczyszczania polipeptydów, pochłaniając wiele doświadczenia i z powodzeniem stosowana w oczyszczaniu długiego peptydu. Przyjmując nowy sprzęt, mieszanie wielu systemów oczyszczania, powtarzające się separacja i inne metody doświadczenia, wskaźnik powodzenia długiego oczyszczania peptydów został znacznie ulepszony.
Czas postu: 2025-07-03