Rekombinaj proteinantigenoj ofte havas plurajn malsamajn epitopojn, kelkaj el kiuj estas sekvencepitopoj kaj kelkaj estas strukturaj epitopoj.Poliklonaj antikorpoj akiritaj imunigante bestojn kun denaturigitaj antigenoj estas miksaĵoj de antikorpoj specifaj por individuaj epitopoj kaj povas esti uzitaj ĝenerale por detekti naturajn strukturojn aŭ denaturigitajn celproteinojn.Flanka avantaĝo de uzado de denaturigitaj proteinoj kiel imunogenoj estas ke denaturigitaj proteinoj tendencas esti pli imunogenaj kaj povas stimuli fortan imunreagon en bestoj.
La esprimsistemo de Escherichia coli estas kutime elektita por antigenaj celoj ĉar ĝi estas la plej multekosta sistemo laŭ tempo kaj mono.Por plibonigi la eblecon de la celproteina esprimo kaj la oportunon de purigo, foje nur malgranda fragmento de la celproteino, kiel ekzemple specifa domajno, estas esprimita.
La tridimensia strukturo de proteinoj
La Specifa Domajno De Proteino
Se la celo de antikorpa preparado estas nur por wb-detekto, estas ekonomie kaj rapide uzi sintezan malgrandan peptidon kiel antigenon, sed ekzistas risko de malforta imunogeneco aŭ ne-regeneco pro netaŭga elekto de peptidsegmento.Ĉar antikorppreparo postulas longan periodon, du aŭ tri malsamaj peptidsegmentoj ofte estas elektitaj por prepari antikorpojn uzantajn polipeptidantigenon por certigi la sukcesprocenton de la eksperimento.
La pureco de polipeptida antigeno por imunigo estas postulata esti pli granda ol 80%.Kvankam pli alta pureco povas teorie akiri antikorpojn kun pli bona specifeco, en praktiko, bestoj ĉiam produktas grandan nombron da nespecifaj antikorpoj, tiel maskante la avantaĝojn de antigenpureco.
Krome, la preparado de antikorpoj de malgrandaj peptidoj devas esti krucligita al la taŭga portanta antigeno por plifortigi ĝian imunogenecon.Du oftaj antigenaj portantoj estas KLH kaj BSA.
Afiŝtempo: Mar-23-2023