En biologia esplorado, polipeptidoj kun longa sekvenco estas kutime uzitaj.Por peptidoj kun pli ol 60 aminoacidoj en la sekvenco, genekspresio kaj SDS-PAGE estas ĝenerale uzitaj por akiri ilin.Tamen, ĉi tiu metodo daŭras longan tempon kaj la fina produkta apartiga efiko ne estas bona.
Defioj kaj solvoj por longa peptida sintezo
En la sintezo de longaj peptidoj, ni ĉiam alfrontas problemon, tio estas, la sterika malhelpo de la kondensa reago pliiĝas kun la pliiĝo de la sekvenco en la sintezo, kaj la reakcia tempo devas esti ĝustigita por ke la reago kompletigas.Tamen, ju pli longa estas la tempo de reago, des pli da kromefikoj estas produktitaj, kaj parto de la cela peptido formiĝas.Tiaj restaĵoj - mankhavaj peptidĉenoj estas ŝlosilaj malpuraĵoj produktitaj en longa peptidsintezo.Tial, en la sintezo de longa peptido, la ŝlosila problemo, kiun ni devas venki, estas esplori la altkvalitajn reagajn kondiĉojn kaj reagajn metodojn, por ke la aminoacida kondensadreago estu pli ampleksa kaj plena.Krome, reduktu la reagtempon, ĉar ju pli longa estas la reagotempo, des pli neregeblaj flankaj reagoj, des pli kompleksaj la kromproduktoj.Tial, la sekvaj tri punktoj estas resumitaj:
Mikroonda sintezo povas esti uzata: Por kelkaj aminoacidoj renkontitaj en la sinteza procezo, kiuj ne estas facile integreblaj, oni povas uzi mikroondan sintezon.Ĉi tiu metodo havas rimarkindajn rezultojn, kaj multe reduktas la reagtempon, kaj reduktas la formadon de du ŝlosilaj kromproduktoj.
Fragmenta sintezmetodo povas esti uzata: Kiam iuj peptidoj estas malfacile sintezeblaj per komunaj sintezaj metodoj kaj ne facile purigeblaj, ni povas adopti la tutan kondensadon de pluraj aminoacidoj en certa segmento de la peptido al la peptida ĉeno entute.Ĉi tiu metodo ankaŭ povas solvi multajn problemojn en la sintezo.
Acilhidrazida sintezo povas esti uzata: acilhidrazida sintezo de peptidoj estas metodo de solid-faza sintezo de N-fina Cys peptido kaj C-fina polipeptido hidrazida kemia selektema reago inter la formado de amidaj ligoj por atingi peptidan ligan metodon.Surbaze de la pozicio de Cys en la peptidĉeno, tiu metodo dividas la tutan peptidĉenon en multoblajn sekvencojn kaj sintezas ilin respektive.Finfine, la celpeptido estas akirita per likvafaza kondensadreago.Ĉi tiu metodo ne nur multe reduktas la sintezan tempon de longa peptido, sed ankaŭ signife pliigas la purecon de la fina produkto.
Longa peptida purigo
La aparteco de longaj peptidoj neeviteble kondukas al kompleksaj komponantoj de krudaj peptidoj.Tial, ankaŭ estas defio purigi longajn peptidojn per HPLC.amiloida serio de polipeptida puriga procezo, sorbanta multan sperton kaj sukcese uzata en la purigo de longaj peptidoj.Per adopto de novaj ekipaĵoj, miksado de multoblaj purigaj sistemoj, ripeta disiĝo kaj aliaj spertaj metodoj, la sukcesprocento de longa peptida purigado multe pliboniĝis.
Afiŝtempo: Apr-18-2023