Kiel altpreciza instrumento, HPLC povas facile konduki al iuj ĝenaj malgrandaj problemoj se ĝi ne estas funkciigita en la ĝusta maniero dum uzo.Unu el la plej oftaj problemoj estas la kolumna kunprema problemo.Kiel rapide solvi misan kromatografon.La HPLC-sistemo ĉefe konsistas el rezervujo botelo, pumpilo, injektilo, kolono, kolumna temperaturkamero, detektilo kaj datumtraktadsistemo.Por la tuta sistemo, la kolonoj, pumpiloj kaj detektiloj estas la ŝlosilaj komponantoj kaj la ĉefaj lokoj inklinaj al problemoj.
La ŝlosilo al kolumna premo estas la areo, kiu bezonas grandan atenton dum uzado de HPLC.La stabileco de kolumna premo estas proksime rilata al kromatografia pintformo, kolumna efikeco, disiga efikeco kaj retentempo.Kolumna premstabileco ne signifas, ke la premvaloro estas stabila ĉe stabila valoro, sed prefere ke la prema fluktuado estas inter 345kPa aŭ 50PSI (permesante la uzon de gradienta elucio kiam la kolumna premo estas stabila kaj malrapide ŝanĝanta).Tro alta aŭ tro malalta premo estas kolumna premo problemo.
La plej inklina al HPLC-malsukcesoj kaj solvoj
1, alta premo estas la plej ofta problemo en la uzo de HPLC.Ĉi tio signifas subitan altiĝon de premo.Ĝenerale, estas la jenaj kialoj: (1) Ĝenerale, ĉi tio estas pro flua kanalblokado.Je ĉi tiu punkto, ni devus ekzameni ĝin pece.a.Unue, tranĉu la enirejon de la vakuopumpilo.Ĉe tiu punkto, la PEEK-tubo estis plenigita kun likvaĵo tiel ke la PEEK-tubo estis pli malgranda ol la solventa botelo por vidi ĉu la likvaĵo gutas laŭvole.Se la likvaĵo ne gutas aŭ malrapide gutas, la solva filtrila kapo estas blokita.Traktado: Trempu en 30% nitra acido dum duonhoro kaj lavu per ultrapura akvo.Se la likvaĵo gutas hazarde, la solva filtrila kapo estas normala kaj estas kontrolata;b.Malfermu la Purgan valvon por ke la movebla fazo ne trairu la kolumnon, kaj se la premo ne estas signife reduktita, la filtrila blanka kapo estas blokita.Traktado: Filtritaj blankkapoj estis forigitaj kaj sonikataj kun 10% izopropanolo dum duonhoro.Supozante, ke la premo falas sub 100PSI, la filtrita blanka kapo estas normala kaj estas kontrolita;c.Forigu la eliran finon de la kolumno, se la premo ne malpliiĝas, la kolumno estas blokita.Traktado: Se ĝi estas bufra saloblokado, lavu 95% ĝis la premo estas normala.Se la obstrukco estas kaŭzita de iu pli tre konservita materialo, pli forta fluo ol la nuna movebla fazo devus esti uzita por rapidi direkte al normala premo.Se la longtempa puriga premo ne malpliiĝas laŭ la supra metodo, la enirejo kaj elirejo de la kolono povas esti konsiderataj kiel konektitaj al la instrumento male, kaj la kolono povas esti purigita per la movebla fazo.En ĉi tiu tempo, se la kolumna premo ankoraŭ ne estas reduktita, la kolumna enireja kribrilplato nur povas esti anstataŭigita, sed post kiam la operacio ne estas bona, estas facile konduki al la redukto de la kolumna efiko, do provu uzi malpli.Por malfacilaj problemoj, kolumna anstataŭaĵo povas esti pripensita.
(2) Malĝusta flukvanto agordo: Ĝusta flukvanto povas esti rekomencigita.
(3) Malĝusta flua proporcio: la viskozeca indico de malsamaj proporcioj de fluoj estas malsama, kaj la responda sistema premo de la fluo kun pli alta viskozeco ankaŭ estas pli granda.Se eble, pli malaltaj viskozecaj solviloj povas esti anstataŭigitaj aŭ remetitaj kaj preparitaj.
(4) Sistema premo nula drivo: ĝustigu la nulon de la likva nivelsensilo.
2, la premo estas tro malalta (1) estas kutime kaŭzita de sistema elfluo.Kion fari: Trovu ĉiun konekton, precipe la interfacon ĉe ambaŭ finoj de la kolono, kaj streĉu la likan areon.Forigu la foston kaj streĉu aŭ tegu la PTFE-filmon per taŭga forto.
(2) La gaso eniras la pumpilon, sed la premo kutime estas malstabila ĉi-momente, alta kaj malalta.Pli serioze, la pumpilo ne povos sorbi la fluidon.Metodo de traktado: malfermu la purigan valvon kaj purigu je flukvanto de 3~5ml/min.Se ne, aervezikoj estis aspiritaj ĉe la degasvalvo uzante diligentan pinglotubon.
(3) Neniu movebla fazo elfluo: kontrolu ĉu estas movebla fazo en la rezervujo botelo, ĉu la lavujo estas mergita en la movebla fazo, kaj ĉu la pumpilo funkcias.
(4) La referenca valvo ne estas fermita: la referenca valvo estas fermita post malakceliĝo.Ĝi kutime iras malsupren al 0.1.~ 0.2mL/ min post fermo de la referenca valvo.
Resumo:
En ĉi tiu artikolo, nur oftaj problemoj en likva kromatografio estas analizitaj.Kompreneble, en nia praktika aplikado, ni renkontos pliajn aliajn problemojn.En mistraktado, ni devus sekvi la sekvajn principojn: nur ŝanĝi unu faktoron samtempe por determini la rilaton inter la hipoteza faktoro kaj la problemo;Ĝenerale, kiam oni anstataŭigas partojn por solvi problemojn, ni devas atenti remeti la malmuntitajn sendifektajn partojn por malhelpi malŝparon;Formi bonan rekordan kutimon estas la ŝlosilo al la sukceso de mistraktado.Konklude, kiam vi uzas HPLC, gravas atenti specimenan antaŭtraktadon kaj taŭgan funkciadon kaj prizorgadon de la ekipaĵo.
Afiŝtempo: Sep-18-2023